항생제 감수성검사 정의과 검사법의 종류

항생제 감수성검사의 뜻과 검사법의 종류 5가지에 대해 알아보겠습니다

 

항생제 감수성검사란?

 

항생물질을 사용하는데 있어서 효과가 나타나느냐 않느냐에 대한 중요한 용어가 감수성과 내성입니다.

 

감수성(Susceptible)

일반적으로 추천하는 특정 용량대로 항생제를 투여했을때 특별한 사항이 발생하지않는한 세균이든,진균이든 감염증이 그 특정농도에서 치료가 되었을때

감수성이 있다고 합니다

 

 

내성(Resistnat)

항생제를 추천하는 용량대로 썼음에도 불구하고 미생물 생장억제에 대한 효과가 나타나지 않을 경우 내성이 있다(생겼다)라고 합니다

 

 

 

 

항생제 감수성 검사

약 20년전 만 해도 Streptococcus pneumoniae(포도산구균)는 penicillin에 대해 모두 감수성이었기 때문에 감수성검사를 실시할 필요가 없었지만,

현재는 penicillin에 대한 내성률이 많이 증가 하였으므로 penicillin은

감수성 검사를 실시해야 하는 약물의 좋은 예입니다

 

• 분리된 균이 항균제에 내성을 잘 나타내는 종류일 때, 뇌막염,패혈증처럼 특이적으로 치료하지 않으면 치명적일 수 있음
•   균을 제거하는데 단순히 정균적인 약이 아니라 빨리 균을 살균하는약을 필요로 하는 감염 (예, 감염성 심내막염) 등의 상황에서는반드시 항생제 감수성 검사를 실시하여 유효한 항생물질을선택하여 치료에 사용하여야 하며 약물내성균의 현상을 알아내어야 함

 

※용어정리

정균적-미생물의 생장을 어느정도 억제시킬수 있는

 

살균적-균의 생장을 사멸시키는

 

용균적-균을 사멸시키고 세포를 없애주는

 

 

 

항생제 감수성 검사법의 종류

 

디스크 확산법(Disc diffusion method) or 페이퍼디스크법

 

검사방법: 배지를 만들어 배지에 미리 배양해놓은 병원성균주를 도말하고 거기에 테스트하고자하는 항생제가 들어있는 페이퍼디스크를 중간중간 올려주게되면 균은 균대로 크게 될것이고 페이퍼디스크에 존재하는 항생제의 종류,농도에 따라 균의 증식이 얼마나 억제되는지 확인을 할 수 있습니다

균을 도말하고 페이퍼디스크를 부착하는 시간을 15분 내외로 해주어야 합니다 너무 균이 많이 큰 상태에서 부착하면 실험결과 데이터의 신뢰도가 떨어집니다(균의 세력을 갖고있는 상태이기 때문에)

 

 

 

• 가장 널리 사용하는 방법으로 이 방법은 증식이 빠른 균들에 대해서 주로 사용할 수 있으며, 검사방법이 쉽고 재현성이 좋으며 경제적이고 신속하며 시험에 특별한 기구 등이 필요치 않아 가장 널리 사용
• 표준 농도의 세균이 함유된 agar plate에 시험 항생제가 함유된 disc를 놓고 항온기(인큐베이터)에서 18~24시간 배양하면 항생제가 agar plate로 확산 되면서 세균의 성장이 억제
• Disc 주위에 형성된 억제대의 직경을 mm 단위로 측정하여 판정기준표와 비교하여 내성 또는 감수성인 지를 판정.
• 일반적으로 억제대의 크기는 MIC와 반비례.
• 이 방법은 현재 미국의 FDA (Food and Drug Administration)에 의해권장되고 있음.
• 유효하고 신속하게 항생물질을 선택할 목적으로 사용되며,약제내성균을 파악하고, 균 동정의 응용에 이용

 

 

 

 

 

 

 

희석법 (Dilution method)

• 항생제 역가 측정을 위해 가장 많이 사용하는 것은 최소억제농도 (minimal inhibitory concentration; MIC)와 최 소 살 균 농 도 ( minimal bactericidal concentration;MBC)를 측정하는 방법
• 액 체 배 지 희 석 법 ( broth dilution method 과한 천 배 지 희 석 법 ( agar dilution method) 이 있음 .
• 희석법은 결과가 정확하며, 연구용으로 주로 사용되고 있는데 액체희석법이 표준화되어 가장 많이 사용.
• 액체배지희석법은 항생제를 두 배씩 연속적으로 희석하여 제조한 액체배지에 균을 접종하여 배양
• 예를 들어 12개의 시험관을 사용한다면 128, 64, 32, 16, 8, 4, 2, 1,0.5, 0.25, 0.125μg/mL 의 11개 시험관을 만들고 한 개의 시험관은 항생제를 넣지 않고 세균이 증식하는 대조시험관으로 사용
• 눈으로 보아 균이 증식하지 않는 시험관 중에서 가장 낮은 항생제농도가 최소억제농도(MIC)이다. 또한 균이 증식하지 않은 시험관의 희석액 일정량을 평판배지에 접종하여 24시간 배양한 후 세균의 집락이 형성되지 않은 최소의 농도가 최소살균농도(MBC)임

 

 

비탁법 (Nephelometry)

비탁계에 의해서 현탁액의 농도를 측정 하는 것으로 빠른 시간내에 감수성 또는 내성을 알고자 할 때 이 방법을 실시함.

 

 

 

 

 

β-lactamase 검사

• Nitrocefin은 무색이지만 β-lactamase에 의해 분홍색으로 변하는 성질을 이용하여 β-lactamase를 생성하는 세균을 찾아냄.
• β-lactamase는 penicillin을 비활성화시키는 효소로 βlactamase 생산이 문제가 되고 있는 Staphylococcusaureus, Haemophilus spp, Neisseria gonorrhoeae 등에서 β-lactamase 검사를 실시하여 감수성 여부를 판단하는데 매우 유용한 검사이며 이 균종에서 양성일 경우 penicillin, ampicillin, amoxicillin에 대해 내성으로 판단

 

 

 

 

E test

검사방법: 디스크방법과 동일, 판정은 배양 후에 형성되어 있는 타원형의 균 발육 억제대가 교차하는 지점의 농도를

MIC 값으로 측정하는 방법으로 매우 간편한 방법 입니다

 

• 기존에 사용되고 있는 디스크 확산법을 응용한 것으로 plastic strip (폭 5mm, 길이 50mm)에 항생제가 농도별로 정량적으로 묻어 있어 MIC (최소억제농도)를 측정.